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金银花粉体的指纹图谱与抑菌活性相关性研究

袁清照

  目的中药粉体以其独特的理化性质优势在中药饮片、中药提取物及中药制剂的应用将越来越广泛,目前尚缺乏规范化的中药质量控制标准,研究还局限于单一成分或指标成分的质量评价层面,中药的有效成分大多尚未明确,最大的缺陷是质量标准与药理作用的相关性不明确。本研究拟在传统的中药质量评价体系基础上,运用多种现代分析方法和评价技术,探索金银花粉体多成分、多靶点协同发挥药效的物质基础,阐明金银花粉体的指纹图谱及抑菌活性的相关性。 方法选择代表性的清热解毒类中药金银花粉体为研究对象:1.以D50为考查指标,采用均匀设计对金银花的超微粉碎时间、温度及水分、介质填充率进行研究;采用显微颗粒图象分析与干粉激光衍射法相结合的方法检测金银花的微粉形貌;2.运用化学成分溶出、挥发油成分的GC-MS对比分析及管碟法测量抑菌活性、MIC测定综合评价金银花两种粒径粉体的有效性;3.运用了HPLC-DAD、及GC分析等多元手段建立了金银花超微粉体的多指标共有模式指纹图谱;4.运用系统溶剂提取法得到金银花超微粉体六个有效部位,分别建立指纹图谱,与各部位抑菌生物活性结果进行多元相关分析。 结果1.优选出金银花粉体的超微粉碎工艺参数:投料量为300g,粉碎时间7min,温度-10~10℃,水分5~7%,介质填充率60~70%;粉体D50≤16μm,显微图像分析表明经超微粉碎后,多数细胞器未见完整显微特征;2.金银花超微粉体比普通粉体溶出速率快,溶出量大;挥发油GC-MS分析结果表明,超微粉体总成分更多,芳樟醇的含量更高;抑菌生物活性显示,超微粉体抑菌强度高于普通粉体;3.建立了10个不同产地的金银花超微粉体的HPLC指纹图谱,确立了27个共有峰,10批样品相似度达到0.75以上;建立了8批金银花超微粉体挥发油的GC指纹图谱,确定了36个共有峰,8批样品相似度达到0.70以上;4.建立了六个不同有效部位的指纹图谱,并建立指纹图谱与抑菌活性的相关性。 结论金银花经超微粉碎后,不论是外观、显微特征还是溶出行为、化学组成等物理化学特性都发生了不同程度的改变,但总体上,超微粉体的有效成分溶出增加,生物利用度得到改进。本研究运用多种现代分析技术对金银花进行全面的质量评价,筛选出与抑菌活性效应密切相关的有效物质群,制订了多级指纹图谱。乙酸乙酯部位含与药效成正相关的峰最多,有效峰面积占总峰面积比例最大,确立了金银花粉体的抑菌活性指纹图谱。研究进一步验证了超微粉体技术在中药领域应用的优越性,对于金银花的合理开发应用提供了良好的实验基础。……   
[关键词]:金银花;粉体;超微粉碎;指纹图谱;抑菌活性;谱效学GC HPLC
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:湖南中医药大学2010年