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山东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒感染状况调查与遗传变异分析

张金强

   近年来,山东地区许多中小规模猪场或散养猪场爆发主要由猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)引起的“猪高热病”。2008年以前猪群发病主要感染新生仔猪和保育猪,2008年至2010年期间发生的“猪高热病”对母猪和育成猪也有较高的发病率和死亡率。为了探明山东省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行及变异状况,本研究重点从血清学和病原学方面进行了研究,从而为该地区本病的预防控制提了供理论依据。 主要包括以下几方面内容: 1、通过对山东地区PRRS流行情况调查显示,未免疫PRRSV疫苗的健康猪群抗体阳性率为50.7%(139/274),免疫弱毒疫苗的猪群ELISA抗体检测阳性率高达87.1%(498/572),而免疫灭活疫苗的猪群ELISA检测抗体仅为69.9%(826/1182)。结果表明山东省规模化猪场在PRRS疫苗免疫之前已经普遍存在PRRSV感染,不同类型的PRRS疫苗引起的免疫应答存在一定的差异。 2、对2008~2010年间收集的212份临床疑似“猪高热病”样品进行了多重RT-PCR检测,结果显示,高致病性PRRSV占57.1%(121/212),CSFV占29.2%(62/212)。PRRSV和CSFV的混合感染占11.8%(25/212)。研究表明高致病性PRRSV是引发近年来“猪高热病”的主要病原之一。 3、将临床疑似病料接种Marc-145细胞进行病毒分离,共获得16个PRRSV毒株,采用噬斑形成试验纯化各个毒株。选取代表毒株SX-1进行动物攻毒试验,能够复制出与“猪高热病”类似临床症状和病理变化的病例。 4、序列分析显示,高致病性PRRSV分离株Nsp2基因高变区均存在不连续缺失30个氨基酸。各毒株Nsp2序列同源性不尽相同。ORF5基因未发现有缺失,存在点突变,GP5蛋白第26~39位氨基酸之间存在一个高变区。 5、完成了PRRSV SX-1、ZP-1和JN-2毒株的全基因测定。结果显示,三个毒株的基因组长度均为15320nt(不含polyA),基因组均存在广泛的变异,但以NSP2、ORF3和ORF5三个基因的变异最为显著,而ORF6和ORF7基因相对保守。……   
[关键词]:PRRSV;多重RT-PCR;分离鉴定;噬斑纯化;序列分析
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:山东农业大学2010年