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母体铅暴露对仔鼠学习记忆及海马中IL-1β和TNF-a表达的影响

郑艳涛

   铅是一种普遍存在的环境污染物,是一种危险的神经毒性金属,尤其对发育期的高等生物。尽管人们一直不断地在努力减少生态系统中的铅水平,但是始终未能彻底使人体摆脱低剂量铅暴露的情况。 目的 本研究通过观察不同水平的母体孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆能力的影响和对仔鼠海马组织中IL-1β和TNF-α表达的影响,进一步探讨IL-1β和TNF-α表达与神经功能损害之间的联系。 材料与方法 1动物分组实验共分四组,分别为对照组、0.3g/L组、1.0g/L组和3.0g/L组。 2标本的采取分别在仔鼠出生后第7天、14天和21天,同一时刻每组各取10只仔鼠,进行尾部采血;在冰上剥离脑组织,取出海马,用于检测海马铅以及进行IL-1β和TNF-α的RT-PCR测定。 3仔鼠血铅、海马铅浓度的测定采用Z-5000石墨炉原子吸收光谱仪测定铅含量。 4仔鼠方形水迷宫的测定使用水迷宫测试检测仔鼠的逃避潜伏期。 5仔鼠海马中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表达量及IL-1β蛋白质含量的测定 分别对各组仔鼠出生后7d、14d和21d的海马组织进行RT-PCR,测定海马中IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达量。 使用双抗体夹心ABC-ELISA法测定各组仔鼠出生后7d、14d和21d的海马组织中IL-1β蛋白质的含量。 结果 1铅暴露对仔鼠血液和海马组织中铅浓度的影响相同年龄段,不同铅暴露组血铅、海马铅浓度差异有统计学意义(P<0.05)。 2水迷宫试验结果随着母体孕哺期铅暴露水平的升高,仔鼠水迷宫测试错误次数随之增加(P<0.05);且仔鼠的平均逃避潜伏期也随之增加(P<0.05)。 3孕哺期铅暴露对仔鼠海马组织中IL-1β和TNF-αmRNA表达的影响 3.1铅暴露铅暴露对仔鼠海马组织中IL-1βmRNA表达的影响 IL-1βmRNA在对照组海马中的表达量较低,随着母鼠铅暴露剂量的增加,IL-1βmRNA的表达随之增加(P<0.05)。 3.2孕哺期铅暴露对仔鼠海马组织中TNF-αmRNA表达的影响 TNF-αmRNA在对照组海马中的表达量较低,随着母鼠铅暴露剂量的增加,TNF-αmRNA的表达逐渐增加(P<0.01)。 3.3ELISA测定孕哺期铅暴露对海马组织中数据IL-1β的表达量 随着母体孕哺期铅暴露水平的增加,仔鼠IL-1β表达量随之增加(P<0.01)。 4相关分析 仔鼠海马中IL-1β和TNF-αmRNA的表达量与仔鼠血铅、海马铅、21日仔鼠水迷宫逃避潜伏期具有显著正相关性。 结论 1母体孕哺期铅暴露可能导致子代血铅和海马铅升高; 2母体铅暴露可以对子代空间学习记忆产生损害,但这种影响是在铅暴露的剂量达到一定程度时才出现的,而且损害程度会随着母体铅暴露剂量的增加而增加; 3母体孕哺期铅暴露导致子代海马组织中TNF-α,IL-1β表达增加,可能是孕哺期铅暴露影响子代学习记忆能力的分子机制之一……   
[关键词]:学习和记忆;;TNF-α;IL-1β
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:郑州大学2010年