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宣木瓜中齐墩果酸的提取分离及其抗氧化作用的研究

盛侠

   宣木瓜是药食两用水果,果实中含有丰富的营养物质和多种活性物质,具有丰富的食用价值和极高的营养保健作用,但由于宣木瓜酸涩味重,人们极少鲜食,目前主要有宣木瓜酒、果醋、果脯、蜜饯等传统食品。随着人们生活水平的提高,越来越重视身体健康状况,更加关注功能性食品的开发与研究。 本研究的主要目的在于以宣木瓜为原料,通过对其营养成分的分析和有效活性成分的齐墩果酸的提取分离纯化鉴定,建立了一种简便易行、绿色、便于工业化的齐墩果酸提取分离工艺,并且对齐墩果酸进行了抗氧化、抗衰老、抗癌等生物学实验研究,为宣木瓜深加工及齐墩果酸的进一步应用提供理论和实验依据。 1.对宣木瓜果实中基本营养成分进行了测定,结果表明新鲜宣木瓜中含水率86.937%、含总糖2.438%、还原糖1.085%、有机酸2.956%、果胶0.918%、单宁1.875%、粗纤维1.894%、蛋白质1.041%、齐墩果酸0.206%、总黄酮0.113%、熊果酸0.124%。 2.采用乙醇为溶剂通过超声辅助提取法提取宣木瓜果实中齐墩果酸。以宣木瓜提取物中齐墩果酸含量考察指标设立正交试验,提取工艺的研究表明:四个因素对提取效果的影响力的顺序为A > C > B > D,即乙醇浓度对提取效果的影响最大,提取时间次之,其次是提取温度,料液比对实验结果的影响最小。超声波辅助提取法最佳工艺组合定为A_3B_1C_1D_1,即乙醇浓度95%,提取温度40℃,提取时间10min,液料比1:20。 3.用大孔树脂分离纯化齐墩果酸,通过对大孔树脂型号选择、静态吸附量及解吸率、动态吸附、洗脱液浓度对纯化宣木瓜齐墩果酸效果的试验,得出洗脱的最佳静态条件。选择D4020型号大孔树脂,以95%乙醇作为洗脱液对样品进行洗脱,平行三次,所得目的物纯度达84%,RSD为0.78%。 4.宣木瓜齐墩果酸具有明显的抗氧化作用。 (1)对自由基的清除作用。宣木瓜中齐墩果酸浓度为1.0mg/mL时对羟自由基的清除作用最大,清除率达65.9%,齐墩果酸浓度为0.8mg/mL组清除率次之,齐墩果酸浓度0.2mg/mL组对羟自由基的清除作用最小,其清除率仅有28.63%,结果表明宣木瓜齐墩果酸对Fenton反应体系产生的羟自由基与浓度具明显的量效关系,并且宣木瓜中齐墩果酸对羟自由基具有较强的清除作用;宣木瓜齐墩果酸对邻苯三酚自氧化产生的O2·-有抑制作用,并且其抑制率随浓度的增大而增大,表明其抑制能力与浓度呈明显的量效关系,宣木瓜中齐墩果酸为1.0mg/mL时对O2·-的抑制作用最强,达到63.83%,0.2mg/mL时对O2·-的抑制率最小,仅有20.75%;当宣木瓜中齐墩果酸为1.0mg/mL时对DPPH自由基的抑制作用最强,达到60.86%,0.2mg/mL时对DPPH自由基的抑制率最小,仅有17.31%,表明宣木瓜齐墩果酸对DPPH自由基有明显抑制作用,并且其抑制率随浓度的增大而增大,表明其抑制能力与浓度呈明显的量效关系。 (2)对衰老小鼠的抗衰老作用。研究了宣木瓜中齐墩果酸的抗衰老作用和免疫功能,用D-半乳糖制造小鼠衰老模型,然后灌胃不同剂量宣木瓜齐墩果酸,以人参皂甙为阳性对照,观察其对小鼠衰老现象以及免疫器官的影响。结果表明,与衰老模型组小鼠相比,宣木瓜齐墩果酸能使衰老小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力升高、丙二醛(MDA)含量显著降低,小鼠的胸腺指数和脾脏指数升高,并且随着药剂量增加,效果更加显著,这说明宣木瓜齐墩果酸能增强抗氧化能力和免疫力,进而起到抗衰老的作用。 (3)采用MTT法研究了宣木瓜齐墩果酸对肿瘤细胞生长的影响,结果表明:宣木瓜齐墩果酸能有效抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖;随着齐墩果酸浓度的增加,其生长抑制作用增强,呈量效关系。……   
[关键词]:宣木瓜;齐墩果酸;提取分离;抗氧化;抗肿瘤
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:安徽农业大学2010年