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多拉菌素产生菌的诱变育种及培养条件的优化

吴婕

   多拉菌素产生菌能产生一种新型的大环内酯类杀虫抗生素,具有高效、低毒、广谱性,在农业生产中具有良好的应用和广阔的市场前景。本试验通过对多拉菌素产生菌ATCC37菌株进行的一系列的物理化学诱变和基因组重排育种,获得了一株产量有显著提高的菌株F5-78。 对原始菌株进行分离复壮,获得一株遗传性能较为稳定的出发菌株ATCC37-6(效价30ug/ml),再经一系列诱变获得菌株N159(效价82ug/ml)和ATCC37-12(长势良好但效价很低),并通过硫酸链霉素和庆大霉素抗性平板筛选,得到S159(Str+Gen-)和G159(Str-Gen+)两个菌株。 以S159 (Str+Gen-)、G159 (Str-Gen++)、ATCC37-12和ATCC37为亲本进行了基因组重排育种研究。通过连续五轮基因重排,筛选获得高产菌株F5-78(效价105.3ug/ml),其发酵效价较原始菌株N159提高了28.4%,且经过连续五次传代,结果显示该菌株稳定性良好。 对该菌株进行了发酵培养基优化,发现碳源以玉米淀粉、氮源以豆粕粉和酵母粉为佳。 研究了温度、装量、移种量和种龄等因素对多拉菌素发酵的影响,结果表明:最适的发酵温度为28℃,种龄42h,前体20%的环己甲酸用量为250ul/30ml,瓶装量30ml,发酵11天时多拉菌素的产量最高。……   
[关键词]:多拉菌素产生菌;ATCC37菌株;诱变育种;基因组重排;发酵工艺优化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2010年