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副猪嗜血杆菌与巨噬细胞相互作用的初步研究

严琦

   副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是一种定殖于猪上呼吸道常在细菌,在特定条件下可以引起革拉瑟氏病(Glasser s disease)。该病以脑膜炎、多发性浆膜炎、关节炎和肺炎为主要特征。研究表明,副猪嗜血杆菌从鼻腔经过支气管侵入肺脏,经血液循环到达全身,进而引起病理损伤和临床症状。大多病猪血浆中可以检测到神经氨酸酶(或唾液酸酶),该酶通过清除宿主细胞表面的唾液酸暴露病原入侵受体和降低粘蛋白的粘性来破坏宿主的免疫屏障,但其致病的分子机制还不清楚。本实验以小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7为模型,比较研究了副猪嗜血杆菌强毒株和弱毒株的抗吞噬能力、诱导细胞凋亡和细胞因子产生的差异。 以副猪嗜血杆菌强毒株(Nagasaki和0165;血清5型)及弱毒株(SW114和4-11;血清3/11型)为研究对象,以RAW264.7细胞系为模型,比较了强弱毒株的抗吞噬能力。结果表明,强毒株比弱毒株有更强的抗吞噬能力,这一结果与最近用原代猪肺泡巨噬细胞所作的研究报道一致。进一步的吞噬抑制试验、胞内存活能力实验的结果也显示出较高的一致性。这些结果提示,RAW264.7细胞系或许能够代替原代猪肺泡巨噬细胞来研究副猪嗜血杆菌与巨噬细胞的相互作用。 以RAW264.7细胞系为模型,采用线粒体膜电位变化及DNA片段化等指标进一步比较研究了副猪嗜血杆菌强弱毒株诱导细胞凋亡的差异,结果表明,强毒株在与小鼠单核巨噬细胞互作的早期引起细胞凋亡的能力明显强于弱毒株。 细胞凋亡不同于其他显性破坏宿主免疫系统的机制,凋亡过程中产生的某些物质可以抑制部分细胞因子的产生,减轻机体炎症反应,避免被宿主免疫系统清除。本研究用脂寡糖抑制剂多粘菌素B处理并热灭活的副猪嗜血杆菌刺激RAW264.7细胞系,检测不同时间白细胞介素-6和白细胞介素-8的表达水平,结果发现处理后的强毒株诱导细胞产生的白介素-8水平显著下降。……   
[关键词]:副猪嗜血杆菌;小鼠单核巨噬细胞;抗吞噬;细胞凋亡;细胞因子
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2010年