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猪伪狂犬病、细小病毒病和乙型脑炎三联灭活疫苗的研制

何永龙

   病毒性传染病是诱发母猪繁殖障碍性疾病的主要因素之一,其中猪伪狂犬病、细小病毒病和乙型脑炎等均可导致妊娠母猪流产,产死胎、木乃伊胎,本研究旨在从生产实际出发,探讨制备一种针对这三种猪繁殖障碍性疾病的多联灭活疫苗,拟达到简化免疫程序、降低免疫成本、减小免疫刺激,起到一针防多病的临床应用效果。疫苗的研制及检验结果如下: 1.三联灭活疫苗的制备 通过在传代细胞上接毒,收获TCID50为10-6.5/0.1mL的猪伪狂犬病毒液8000mL,HA为29细小病毒液8000mL,将病毒液灭活后分别通过透析和超滤这两种不同的方法进行浓缩,再与稀释过的乙型脑炎病毒液等体积混合,将混合后的病毒液与一定比例的佐剂混匀,通过组织捣碎机和胶体磨两种不同的乳化设备进行乳化,共试制了猪伪狂犬病、细小病毒病和乙型脑炎三联油乳剂灭活疫苗2个批次,一个批次为1000mL,另一个为3000mL。 2.三联灭活疫苗的检验 对试制疫苗进行物理性状及细菌检验均符合疫苗检验要求。将试制疫苗接种妊娠母猪、后备母猪及Balb/C小鼠,接种后试验动物采食生长正常,无异常反应,妊娠母猪无流产、产死胎和木乃伊胎的记录。将试制三联灭活疫苗进行Balb/C小鼠的免疫与效力保护性试验,小鼠在二免后21d,PRV平均中和抗体指数达到1:28.5,用105.0TCID50的猪伪狂犬强毒足垫部位攻击小鼠,疫苗对小鼠保护率达到90%;用试制三联灭活疫苗进行KM小白鼠的免疫与效力保护性试验,二次免疫后21d用105.84PFU的P3株强毒对小鼠进行腹腔攻毒,疫苗对小鼠的保护率达到80%;用试制的三联灭活疫苗免疫豚鼠,二次免疫后10周,豚鼠的PPV HI抗体水平仍然维持在1:210以上。 3.三联灭活疫苗对猪的免疫原性试验 将试制三联灭活疫苗免疫6月龄的后备母猪发现,产生的猪伪狂犬病毒ELISA抗体平均水平和猪伪狂犬病毒单价灭活疫苗所产生的抗体水平相当;三联灭活疫苗产生的细小病毒HI抗体水平要高于猪细小病毒灭活疫苗;猪乙型脑炎病毒的ELISA抗体水平低于猪乙型脑炎弱毒疫苗。……   
[关键词]:;伪狂犬病;细小病毒病;乙型脑炎;三联灭活疫苗
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2010年