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猪圆环病毒2型(WH株)灭活疫苗效力的研究——PCV2在肠、肾的分布变化

张玉丹

   猪圆环病毒2型(PCV2)感染能够引起包括断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)在内的多种疾病。由于该病毒的致病力不高,所以并未引起人们的广泛关注。但随着各地PMWS等疾病的相继爆发,人们检测发现PCV2已呈全球分布,猪群感染率也越来越高。在防治PCV2的感染及传播方面,国内外试验均表明,安全有效的疫苗是主要措施之一。目前,中国还没有商品化的疫苗问世。 本试验通过深入研究PCV2-WH株灭活疫苗免疫和未免疫攻毒后其肾和肠道的组织结构变化,结果显示该疫苗在该组织中对PCV2-WH株能够有效的保护,并不会对产生不良反应。本课题取40头25-35日龄仔猪,随机分成8组,每组5头。取其四组均于颈部肌肉注射2mL×107.0TCID50疫苗,余四组则不免疫作为对照组。具体研究内容如下: 1.PCV2(WH株)灭活疫苗对肾的作用效力 本试验采用HE染色方法比较各组肾的病理学变化;采用电镜观察比较各组超微结构变化。结果显示PCV2-WH株能够引起肾小球内充血,严重破坏细胞内的膜结构;PCV2阳性信号既在肾小管上皮有分布,还在肾小球内有分布,呈强嗜肾性,提示该病毒临床上可能引起PDNS的爆发。对照组HE染色显示病变组织与免疫组化显示PCV2组织的结果一致,免疫组中有部分PCV2阳性组织未有明显病理变化,尤以免疫3w后攻毒组为最。这就表明PCV2-WH株能够引起肾的病变,而PCV2-WH株灭火疫苗对肾有一定的保护力,其中最佳保护效力为免疫3w后。在PCV2阳性组织的电镜观察显示有直径约80nm的颗粒分布在细胞之中,提示或者试验动物感染有其它的病原,或者该颗粒为免疫后形成的特定颗粒。 2.PCV2(WH株)灭活疫苗对肠的作用效力 本试验采用HE染色方法比较各组肠的病理学变化;采用电镜观察比较免疫后攻毒组和未免疫攻毒组的超微结构变化。结果显示PCV2(WH株)能够引起十二指肠肠腺充血,阳性信号集中分布于回肠的黏膜固有层中,并在其PP中也有阳性细胞的分布,提示该病毒在临床上可能引起腹泻。对照组的PCV2阳性率不高,且主要是3w后有阳性,提示PCV2-WH株对肠的嗜性不强,且感染期位于攻毒后1-2w内。HE染色显示病变位于十二指肠,而免疫组化却显示PCV2分布于回肠,提示PCV2-WH株不会直接导致肠病变。但同时在免疫组既无一例有病变,也无PCV2,提示PCV2-WH株灭火疫苗能够抑制PCV2-WH株在肠内增殖,而PCV2-WH株会间接导致肠病变。电镜结果同样显示其膜结构也受到损伤,提示该病毒对生物膜的特殊破坏性。 3.PCV2(WH株)在肾、肠中所引起的凋亡的变化 本试验采用TUNEL法比较了各组细胞凋亡的变化,结果显示该病毒能够引起凋亡数目的增加,与前人的报道大体相符。提示该疫苗在缓解PCV2所引起的凋亡方面具有一定的效力。……   
[关键词]:猪圆环病毒2型;;;细胞凋亡
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2010年