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检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

黄立平;刘长明;危艳武;陆月华;郭龙军

  利用抗PCV2-Cap蛋白中和性单克隆抗体建立了一种阻断ELISA方法,用于检测猪血清中PCV2中和抗体。该方法将PCV2多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原,以辣根过氧化物酶标记的单抗为指示抗体,通过测定该酶标单抗显示阻断ELISA检测结果。该方法与免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)对353份试验猪血清样品进行了平行检测,两种方法检测符合率为96.0%,与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。阻断ELISA与血清中和试验检测结果呈显著正相关性(r=0.9970)。用阻断ELISA对PCV2灭活疫苗免疫与攻毒试验猪血清样品检测结果显示,疫苗接种2周开始能够检测到PCV2中和抗体,4周后阳转率达100%;此外,对东北3省不同地区送检的703份血清样品进行检测,阳性检出率为73.4%。本研究建立的阻断ELISA具有操作简便、特异和敏感等特点,可为PCV2血清学流行病学调查及疫苗免疫评价提供了一种有效技术手段。……