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两种剂量重离子辐射绵羊精子蛋白质组差异分析

李鸿岩;赵兴绪;张红;王燕玲;李发弟;马友记;张勇

  (目的)为了获得绵羊精子蛋白质二维电泳图谱,并对0.5Gy和3Gy剂量重离子辐射绵羊精子蛋白质做差异分析.(方法)本研究比较了热的Trizol法制备蛋白质不同上样量对绵羊精子蛋白质二维电泳图谱的影响,利用PDQuest 8.0分析0.5Gy和3Gy剂量2D图谱差异蛋白质点.(结果)结果显示:二维电泳图经硝酸银染色、PDQuest 8.0分析,合适的上样量为0.35mg(pH4~7),蛋白质分子量基本分布在25~66.2kDa.差异凝胶电泳揭示绵羊精子蛋白质经0.5Gy和3Gy剂量重离子辐射后有质和量的改变:其中0.5Gy剂量新表达的蛋白质点有5个,缺失的有1个,表达上调的有3个,表达下调的有2个;3Gy剂量新表达的蛋白质点有8个,缺失的有1个,表达上调的有4个,表达下调的有3个.作为一项阶段性的实验成果,研究表明,热的Trizol法制备精子蛋白结合合适的上样量能够建立绵羊精子全蛋白质图谱,研究发现的重离子辐射引起差异表达蛋白质点为进一步研究重离子辐射绵羊精子蛋白质组学奠定了基础.……