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不同剂量鸭IFN-α真核表达质粒基因枪免疫对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭细胞和体液免疫调节作用研究

程志萍;程安春;汪铭书;陈斌;刘闯;段坤;周雪;龚永强;陈孝跃

  为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-sDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本研究将 pcDNA-SDIFN-α以1、3和6μg/只3个剂量用基因枪轰击法分别免疫28日龄鸭, 以 PBS 和空载体质粒 pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15 d 后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗,接种后第3、 7、14、21、28、35、49、63、84 d 采血用淋巴细胞增殖试验(MTT 法)测定鸭外用血中 T 淋巴细胞转化效果和第7、14、21、28、35、49 d 采血用流式细胞仪(FACS)测定 CD_3~+T 淋巴细胞数量的动态变化.第7、14、21、28、35、49、63、84、105、126、154、182 d 采血用间接 ELISA 法检测血清抗体水平。结果发现:不同剂量 pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭外周血 T 淋巴细胞转化功能均极显著(P≤0.01) 或显著(P≤0.05)高于弱毒和空载体对照组.不同剂量 pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭 CD_3~+ T淋巴细胞数量均显著(P≤0.05)或极显著(P≤0.01)高于弱毒和空载体对照组.在第7 d 时,所有组鸭血清抗体水平都迅速升高,在28 d 时达到高峰,其高抗体水平维持一段时间后缓缓下降.不同剂量 pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭血清抗体 IgG 于7~154 d 高于弱毒对照组和空载体对照组,有显著差异 (P≤0.05).在诱导细胞免疫和体液免疫方面,弱毒和空载体对照组间无显著差异(P≥0.05).研究表明,pcDNA-SDIFN-α提前15 d 免疫能显著增强 DP 弱毒疫苗诱导的鸭细胞免疫和体液免疫能力, 以基因枪免疫1μg/只的效果最佳,是一种良好的增强 DP 弱毒疫苗细胞免疫的分子佐剂.……