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ESTs测序及利用cDNA微阵列芯片研究红色毛癣菌对两种抗真菌药物的转录图谱(英文)

于录;邓旭明

  红色毛癣菌是一种重要的二型致病真菌,能导致人的甲癣、脚癣等皮肤真茵病。酮康唑(ketoconazole, KTZ)等唑类抗真菌制剂通常用来治疗皮肤真菌引起的感染。多烯类抗真菌药物两性霉素B[Amphotericin B(AMB)] 对皮肤真菌治疗无效,但是在体外对红色毛癣菌却表现出很好的活性。为了鉴定药物对红色毛癣菌的作用机制,我们从来自于不同发育阶段的孢子和菌丝体构建了红色毛癣菌cDNA文库,获得了11.085 unique ESTs,并通过序列分析和数据比对鉴定了已知基因和定义了假定新基因,提出了一些红色毛癣菌中可能的代谢途径。我们构建了有11232 个点的cDNA microarray,并通过其全面考查了红色毛癣菌对酮康唑和两性霉素B的转录图谱。红色毛癣菌被分别暴露于亚抑菌浓度(sub-inhibitory concentrations)KTZ和AMB 12小时,而后通过微阵列芯片检测基因的表达情况。实验结果表明,KTZ对红色毛癣菌的作用是抑制细胞色素P450酶14-α羊毛甾醇去甲基化酶,AMB对红色毛癣菌的作用同酿酒酵母和白色念珠菌一样在体外是有效的,且作用机制相似,即与真菌细胞膜中的麦角甾醇结合,破坏细胞膜完整性从而最终导致细胞死亡,AMB对皮肤真菌治疗无效可能是由于AMB很难在汗液和皮脂中分泌而通过被动扩散在皮肤的外层取得较低的组织水平所致。这是国际上首次关于用红色毛癣菌微阵列芯片进行药物作用研究的报道。……