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犬瘟热病毒核蛋白基因重组载体的构建与鉴定

鞠会艳;夏咸柱;高玉伟;杨松涛;李彦舫

  为构建含犬瘟热病毒核蛋白基因的重组载体质粒,用Mlu I和Sph I双酶切真核表达载体pVAXLPN获得CDV N基因表达盒,将CDV N基因表达盒克隆入预先用Ssp I酶切后的线性化质粒pVAX△E3中,构建含CDV N基因表达盒的转移质粒pVAX△E3LPN。用NruI和Sal I双酶切转移质粒pVAX△E3LPN,回收E3区部分缺失的含CDV N基因表达盒的目的片段,定向克隆人同样酶切处理含CAV-2全基因组的质粒载体ppoly2-CAV-2中,构建E3区部分缺失的包含CDV N基因表达盒的重组质粒pCAV-2·CDVLPN,该重组质粒经酶切鉴定正确。本研究为进一步研制含犬瘟热病毒核蛋白基因的重组病毒和研制有效预防犬瘟热暴发的新型重组疫苗奠定了基础。……