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PRRSV SD-1株ORF7基因的克隆、测序及原核表达载体的构建

李俊;王金宝;任慧英;朱新产;周顺;张祯涛

  参照PRRSV ATCC VR2332株基因序列设计一对引物P1,P2,经RT-PCR扩增出PRRSV SD-1株ORF7基因,经与PMD18-T Vector连接后筛选出阳性克隆株测序。把PRRSV SD-1株ORF7 cDNA亚克隆到PQE上构建PQE-N原核重组表达载体。结果表明:PRRSV SD-1株ORF7核甘酸的序列与PRRSV ATCC VR2332株ORF7核甘酸序列完全一致,与欧洲株LV符合率为58%。本研究成功构建原核表达载体PQE-N,为N蛋白的研究和制备诊断性抗原奠定了基础。……