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脾脏中仔猪腹泻抗性候选基因的筛选

亓小红;张勤;刘培琼;宋春云;徐如海

  大肠杆菌引发的仔猪腹泻是养猪生产中存在的普遍疾病,是影响养猪业经济效益的重要因素。从遗传上提高仔猪对腹泻的抵抗能力是减少仔猪腹泻发生率的最有效手段。差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)技术,可比较不同细胞或相同类型细胞在不同条件下mRNA的表达差异,其用于疾病研究即可检测某一疾病状态的特定细胞型的基因表达情况。试验以久仰香猪、剑白香猪和长白猪为材料,以品种间同一组织脾脏不同的发病状态为对照,RNA样品混池后,采用3条锚定引物x 7条随机引物,共21个引物组合,硝酸银显色,进行差异显示研究,筛选仔猪腹泻抗性相关特异表达基因,并确定与仔猪腹泻抗性有关的候选基因。在脾脏未发病池中检测到5条特异表达基因,其中三条为相似性较高的已知功能基因,一条与Nck转导蛋白同源;另一条与长散布元件反转录酶同源;第三条与网格蛋白轻链A同源。一条为相似性性较高的未知功能序列,一条为新序列。脾脏是外周淋巴器官,是淋巴细胞接受抗原刺激产生免疫应答的场所。抗原通过胞吞作用到达溶酶体或到达内区,如MHC-Ⅱ。由MHC-Ⅱ将其提呈给CD4+Th,进一步激发体液免疫反应。网格蛋白轻链A在抗原运送和合成抗体的输送中起重要作用。LINE-1反转录酶在细胞应激时(如病毒、细菌侵入,药物等)自免疫疾病中发挥一定的作用。脾脏的另一功能区就是作为淋巴细胞成熟部位的生发中心,作为信号转导蛋白,Nck通过活化免疫细胞,在免疫系统中发挥作用。……