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保加利亚乳杆菌β-半乳糖苷酶基因克隆和序列分析

孙哲;王春凤;潘保良;汪明

  以抗生素抗性基因为选择标记的载体显然不适合“食品级”表达载体的要求.以产物可利用碳水化合物的基因为选择标记无疑是最佳的选择.β-半乳糖苷酶基因即是其中之一。为了构建“食品级”表达载体,本研究根据genebank中已注册的保加利亚乳杆菌β-半乳糖苷酶基因序列设计引物,以保加利亚乳杆菌总DNA为模版PCR扩增β-半乳糖苷酶基因.结果:成功地扩增出保加利亚乳杆菌β-半乳糖苷酶基因.大小约为3.6kb左右.经测序分析为3484bps,与genebank中原序列的同源性达99.99%。这就为构建以β-半乳糖苷酶基因为选择标记的表达载体奠定了基础。……