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禽Ⅰ型副粘病毒病快速诊断及广西分离株F基因的研究

韦平;刘禄

  本研究依据禽Ⅰ型副粘病毒(APMV-1)融合蛋白(F)基因裂解位点的核苷酸序列与其毒力的相关规律.分别设计合成了四条寡核苷酸引物,建立了一个可快速检测各种禽源APMV-1并可鉴定强、弱毒株的逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术。本方法只需一个RT-PCR反应,整个过程在8小时内完成.既可取病毒感染鸡胚的尿囊液检测,也可从病料直接检测。应用该方法对源于各种禽类的87份疑为APMV-1感染的病料样品进行检测试验.结果阳性检出率为81.6%.与常规方法检测的结果相一致。研究对鸡、鹅、鸽三种禽源APMV-1广西分离株F基因N-端前段进行了RT-PCR扩增及核苷酸序列测定.并用基因分析软件DNAStar进行分析并与已发表的其它参考毒株进行分析比较。结果发现.广西分离株在裂解位点的氨基酸组成和排列均符合强毒株的特征,与毒株在临床上的致病情况相符,而根据经典毒力测定方法(MDT和ICPI)所得的结果与其在临床上的致病情况并不完全相符.有些毒株则未能判定其毒力的强弱;根据APMV-1 F基因第47位-第420位核苷酸序列所绘制的系谱树(phyloge-netic tree)来看.广西鸡和鹅分离株都归属于基因型Ⅶ。证明近年来广西流行的基因型与国内其他地区流行的情况相同。此外.本研究还首次证实我国常用的中发型疫苗毒株Ⅰ系(Mukteswar株)属于基因型Ⅶ。……