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一新亚型鸡干扰素基因的克隆与表达及其抗病毒活性

夏春;刘津;汪明

  本研究从三黄鸡基因组中分离了一新亚型Ⅰ型干扰素基因(GGIFN α4)。GGIFN α4全长193个氨基酸,含31个信号肽和162个成熟多肽。GGIFN α4与已报道的鸡Ⅰ型干扰素?基因长度一致,有6处氨基酸发生点变异,氨基酸水平同源性为96.9%~98.4%。将GGIFN α4基因插入含有T5强启动子的pQE30表达载体,在M15(pREP4)工程菌中表达了N’端含6×His的融合蛋白;经提取包含体、变性、Ni—NTA纯化、复性、SDS—PAGE和Western Bl9ot分析以及抗滤泡性口炎病毒活性测定,纯化的表达蛋白为鸡重组干扰素(rGGIFN α4)。rGGIFN α4的抗病毒活性为1×10~6unit/mg;并在体内外水平能抵抗和消除禽流感病毒感染。……