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鸡毒霉形体HS株pMGA多基因族序列分析

沈青春;毕丁仁;翁长江;李自力

  本研究用限制性核酸内切酶对鸡毒霉形体HS株基因文库中经初步估测可能含有4个pMGA基因的Mgw17重组质粒进行了不同组合的酶消化,根据消化片段的大小及酶切位点绘制了7.5kb外源片段的物理图谱;然后根据所得的物理图谱,选用Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ将Mgw17外源片段酶解成大小为1.3kb、2.0kb、4.2kb 3个部分,分别亚克隆到SK(+)质粒上,得到了三个亚克隆子SGp100、SGp200、SGp300。使用核酸外切酶缺失法构建缺失子系列,经序列分析后得到MgW17外源片段的全部序列。经分析可见序列全长7434bp,中间含有两个完整的pMGA基因和另两个不完整的pMGA基因的首部和尾部,分别将它们顺次命名为H-pMGA1.1、H-pMGA1.2、H-pMGA1.3和H-pMGA1.4,两个完整的pMGA基因的阅读框长度分别为1971bp(1.2)和2043bp(1.3);H-pMGA 1.1首部不完整的阅读框的长度为720bp,尾部不完整的H-pMGA 1.4的长度为1752bp。本文将H-pMGA基因与已报道过的MG.S6株、F株的pMGA基因进行了比较,探讨了pMGA基因在不同MG菌株中的相似性、基因启动子结构的差异、间隔区内GAA重复序列对转录调控的影响等。……