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禽脑脊髓炎病毒VP0基因的克隆与序列测定

韦莉;刘爵;姚炜光;张方亮;周蛟;王平;曹永长;毕英佐

  根据发表的AEV序列设计一对引物,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,在体外从AEV分离株L2Z株感染的SPF鸡胚病变组织中扩增出VPO基因。将VP0基因克隆到质粒pBssK载体的Kpn Ⅰ酶切位点上,构建成含有VP0基因的重组质粒VP0-pBssK。进一步序列分析表明,该基因长726bp,编码242个氨基酸,与AEV1143株的核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.2%和97.5%。与小RNA病毒科其它病毒属相应基因的氨基酸同源性比较发现,该病毒与人甲肝病毒同源性最高,在系统进化树上,与甲肝病毒之间距离最近,表明AEV与甲肝病毒属之间亲缘关系密切,给AEV病毒的确切分类提供了重要的实验数据。……