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应用杆状病毒载体在昆虫细胞表达马立克氏病病毒Meq基因

韦平;Lucy F. Lee

  本研究应用杆状病毒/昆虫细胞系统来表达马立克氏病病毒(MDV)Meq基因。源于MDV GA株的Meq基因被克隆到杆状病毒转移载体质粒pBluBac4中强有力的多角体蛋白启动子(PPH)之后,经与线性化的Bac-N-BlueTM DNA共转染于昆虫细胞系SF9,获得了重组杆状病毒。使用重组痘病毒表达的Meq制备的单抗对重组杆状病毒感染的SF9细胞及其裂解物分别进行间接免疫荧光试验、Western Blotting和免疫沉淀试验的检测,结果发现:1、本表达系统产生的Meq可被原制备的单抗所识别;2、在感染细胞中,Meq蛋白仅局限于细胞核内,而且随着感染后(PI)时间的增加,具有从核质向核仁和核膜转移的趋向;3、Western Blotting和免疫沉淀试验均证实重组杆状病毒感染细胞的裂解物中出现有两条特异带(60kD处)。本研究的结果证明杆状病毒/昆虫细胞系统用于表达外源蛋白是可行有效的。……