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草菇基因工程育种研究

林俊芳;郭丽琼;王杰;赵风云;张凯

  本研究采用基因工程技术,从多种食用菌中克隆了gpd启动子,从异源生物中克隆了目的基因抗冷冻蛋白基因(afp)和多功能纤维素酶基因(mfc),采用多种转化方法把afp基因和mfc基因导入草菇细胞中,有目的地改良现有草菇菌株存在的不耐低温和生物转化率低的缺陷。研究结果表明:(1)草菇内源gpd启动子比异源的35S启动子或双孢蘑菇gpd启动子具有较强的驱动外源基因表达的功能活性;(2)农杆菌介导法和PEG介导的原生质体法是草菇外源基因转化的有效方法;(3)afp基因既可以作为目的基因改良草菇的不耐低温缺陷,又可以作为草菇的安全筛选标记基因在0℃低温下筛选草菇转化子;(4)转afp基因的转基因草菇的耐冷性比非转基因草菇对照高出2-3倍;(5)转mfc基因的转基因草菇的生物转化率比非转基因草菇对照高出5-8%。……