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临床用抗核抗体检测试剂盒用于检测啮齿类动物血清抗核抗体的验证

洪敏;沈连忠;李波

  目的:在药物特别是疫苗类药物的临床前安全性评价中,评价药物是否会引起自身免疫毒性是非常重要的内容,毒理学家一直在寻找可靠的检测手段。以临床自身免疫性疾病的诊断相似方法,通过检测药物是否在动物体内诱导抗核抗体产生,是评价药物是否会引起自身免疫毒性的方法之一。临床上对于自身免疫的诊断依赖于检测到体内抗核抗体生成,检测方法常用间接免疫荧光法IIF、酶联免疫吸附法ELISA等,其中间接免疫荧光法是检测抗核抗体的 金标准 ,但并没有商品化的针对临床前安全性评价动物抗核抗体检测的试剂盒。因此,本研究的目的在于通过建立动物疾病模型,验证临床上常规使用的抗核抗体检测试剂盒是否能够用于啮齿类的抗核抗体检测。方法:采集MRL-fas~(lpr)/J小鼠自发系统性红斑狼疮模型血清和与生理盐水处理的正常Balb/c小鼠血清,用市售临床用抗核抗体间接免疫荧光法试剂盒进行检测,二抗加FITC标记的兔抗小鼠IgG,荧光显微镜观察模型动物和正常动物血清的荧光强度和细胞核荧光染色情况;BN大鼠,皮下注射HgCL_2 1mg/kg×6次造模,通过尿蛋白检测模型成功后,采集血清,用市售临床用抗核抗体间接免疫荧光法试剂盒进行检测,二抗加FITC标记的兔抗大鼠IgG,荧光显微镜观察模型动物和正常动物血清的荧光强度和细胞核荧光染色情况。结果:MRL-fas~(lpr)/J小鼠自发系统性红斑狼疮模型血清和HgCL_2模型组大鼠血清出现较高滴度的抗核抗体,荧光强度较高,而对照组血清只显示非常弱的非细胞核特异性荧光。结论:临床用抗核抗体间接免疫荧光法检测试剂盒可以用于啮齿类动物血清抗核抗体的检测使用。……