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茶树中咖啡碱合成酶基因的抑制及在其他生物体中的表达

余有本;江昌俊;王朝霞

  本研究通过RT-PCR法扩增出TCS基因cDNA编码区全序列,并将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,在表达宿主菌BL21trxB(DE3)中高效表达产生分子量约为62kDa的融合蛋白,表达蛋白总量最高可达到菌体总蛋白的39.14%;体外酶促反应表明,表达的融合蛋白能催化可可碱甲基化生成咖啡碱,具有正常的生物学活性。……