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TBa过敏原表位区段的表达及免疫活性分析

任晓霞;张政;蔡桂红;李玉英;王转花

  目的确定苦荞过敏原TBa(tartary buckwheat allergen)的主要表位区段,为进一步研究荞麦过敏原结构和功能及低致敏性荞麦品种提供依据。方法以TBacDNA为模板,设计引物,构建TBa的四个表位区段的重组原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组目的蛋白经Ni2+-NTA亲和纯化后,采用间接性和抑制性ELISA以及点杂交技术对纯化的目的蛋白进行免疫活性测定。结果获得了纯度较高的重组表位蛋白(E12、E3、E6、E36),且免疫活性分析表明,重组表位蛋白与荞麦过敏症患者血清均有IgE结合活性,其中E1的活性最强。结论E1可能是苦荞过敏蛋白TBa中最重要的抗原结合区域之一。……