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何首乌Ⅲ型PKS基因的克隆和表达分析

生书晶;赵树进

  目的克隆并表征中药材何首乌(Fallopia multiflora)中的Ⅲ型聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)基因。方法根据已知PKS基因的保守序列设计简并引物,RACE技术克隆何首乌中的PKS基因;利用生物信息学工具分系其生化特征,RT-PCR分析其在各组织中的表达差异。结果首次从何首乌中克隆到一种Ⅲ型PKS基因FmPKS2(GenBank登录号:GQ984139)。与迄今报道的绝大部分Ⅲ型PKS含有一个内含子不同,其基因组DNA含有三个内含子。该基因在不同组织中均有表达,在块根中表达量最高。结论该基因在何首乌不同组织中的表达模式与二苯乙烯苷、蒽醌类等活性次生代谢产物的积累模式一致,推测该基因可能参与了某种次生代谢物的生物合成。通过生物信息学工具对其编码蛋白的各种理化性质进行预测,为进一步研究其功能奠定了基础。……