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中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究

缪晓青;张其康;樊少华;吴珍红

  以中华蜜蜂的工蜂成体为提酶材料,经正丁醇提取、硫酸铵分级沉淀,0.15%NaCl 溶液透析,得粗酶液。用Sephadex G-150葡聚糖层析柱纯化粗酶,获得提纯的碱性磷酸酶,提纯倍数为16.79,比活力达到135.85 U/mg。以对硝基苯磷酸二钠(PNPP)为底物,测定提纯后的碱性磷酸酶的理化性质。结果表明:该酶的最适温度为45℃,最适pn值为8.6,米氏常数(Km值) 为0.97×10-3mol/L。甲醛、甲醇、乙醇和乙二醇对碱性磷酸酶均有抑制作用。……