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棉铃虫HSP70基因cNDA片段的克隆与分析

赵娜娜;艾辉;王伟娜;陈冲;李神斌;王国秀

  本研究通过RT-PCR同源扩增,首次克隆了棉铃虫(Heliothis armigera)热休克蛋白70(HSP70)cDNA片段。该cDNA片段长1337bp,其中包括开放阅读框(ORF)的起始密码子ATG,推测该序列编码445个氨基酸。序列分析发现,所克隆的棉铃虫HSP70部分序列包含真核生物HSP70高度保守的3个家族标签:IDLGTTYS、IFDLGGGTFDVSIL和IVLVGGSTRIPKVQK。此外,还存在Dank特征基序DLGTT-S-V,ATP/GTP结合位点AEAYLGKT(133-140),非细胞器基序(Non-organellar consensus motif)RARFEEL,核定位序列(Bipartive nuclear localization signals)KRKYKKDLTTNKRALRRL、KRALRRLRTSCERAKRTL和1个糖基化位点NKSI。同源序列比对结果表明,棉铃虫HSP70与其他真核生物的HSP/HSC70有着较高序列同源性(91%—99%),其中与粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)热休克蛋白70(HSP70)同源性最高,达99%。系统进化树分析表明,棉铃虫的Hsp70氨基酸残基序列与甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)、粘虫(Mythimna separata)、粉纹夜蛾等物种的Hsp70聚在一支,而与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的Hsp70相分离。半定量RT-PCR结果表明,HSP70在对照组和感染组中均有表达,但两者没有显著性差异(P>0.05),初步推断该蛋白是一个结构型HSP70。……   
[关键词]:棉铃虫;热休克蛋白70;基因克隆;序列分析
[文献类型]:会议论文
[文献出处]: 《华中昆虫研究(第6卷)2010年