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DP1/02株鸭源Ⅰ型副粘病毒F基因真核质粒构建及实验免疫研究

张秀峰;王中华;刘佳旭;刘艳华;母连志;李国江;丁壮

  应用RT-PCR方法从鸭源Ⅰ型副粘病毒DP1/02株中扩增F基因并克隆入pMD18-T载体,经序列测定、分析,结果显示DP1/02株F基因与NDV国家标准强毒F48E9株的核苷酸、氨基酸序列同源性均达到99%。随后将F基因克隆入真核表达载体pCI-neo,构建真核表达质粒pCI-F,将阳性质粒体外转染Vero细胞,通过间接免疫荧光对真核质粒的表达进行鉴定,利用pCI-F质粒进行动物实验。结果表明构建的真核表达质粒pCI-F能够在Vero细胞中表达,雏鸭免疫14天后在体内可检测到特异性抗体,二次免疫雏鸭后,对NDV强毒的攻毒保护率为73%。本实验为利用F基因构建的核酸疫苗提供了重要的技术支持。……