手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

鸭肝炎病毒1型“自杀性”DNA疫苗的构建及其免疫评价

付玉志;李传峰;陈宗艳;刘光清

  目的:构建Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的自杀性DNA疫苗,探索其在细胞中的表达和对雏鸭的免疫保护效果。方法:将鸭肝炎VP1基因插入甲病毒复制子载体pSCA1载体中,获得重组表达质粒pSCA1/VP1。将该质粒转染BHK-21细胞,分别用RT-PCR、间接免疫荧光和Western Blot等方法检测VP1蛋白的表达;用pSCA1/VP1质粒免疫雏鸭,然后用MTT法检测淋巴细胞增殖情况,用ELISA方法检测雏鸭特异性抗体,用血清中和试验检测雏鸭血清中和抗体;最后,对两次免疫的雏鸭进行野毒攻击试验,检测其免疫保护效果。结果:pSCA1/VP1转染BHK-21细胞后,不仅成功表达了VP1基因,而且能诱导细胞发生凋亡;动物试验结果表明,pSCA1/VP1不仅可以明显诱导雏鸭淋巴细胞增殖,而且可以诱导雏鸭产生较高滴度的DHV特异性抗体,并对雏鸭有良好的免疫保护作用。结论:本研究为进一步研制抗DHV-1感染的DNA疫苗奠定了良好基础。……