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KGF噬菌体模拟肽促进表皮细胞增殖的实验研究

姜笃银;付小兵

  目的 KGF由间质细胞产生,通过旁分泌机制分泌,与上皮细胞上的特异性受体相结合,与上皮创面愈合、胚胎发育、肿瘤的形成与发展及免疫重建等多方面关系密切,是一种多功能的生长因子。目的应用噬菌体随机七肽库生物淘选具有刺激表皮细胞生长作用的hFGF-7噬菌体模拟肽。最终目的是用于促进创面愈合。方法以KGF单克隆抗体为靶,进行4轮生物淘选噬菌体随机七肽库,随机挑取单克隆噬菌体,进行ELISA检测,对结合活性较好的单克隆噬菌体提取噬菌体DNA,进行测序,并进行序列分析。应用MTT方法和免疫荧光方法,检测特异性噬菌体模拟肽对表皮细胞生长的促进作用。结果经过4轮生物淘选,特异性噬菌体模拟肽获得了富集,测序获得6个与KGF相似或相关的碱基序列,其中,两个序列与KGF相似,四个序列与EGF相似,三个序列与MAPK相似。MTT和免疫荧光结果显示KGF和六个噬菌体模拟肽能够显著地促进表皮细胞增殖,噬菌体促进表皮细胞增殖的作用不显著。结论从噬菌体随机七肽库中可以淘选到KGF噬菌体模拟肽,能够显著促进表皮细胞增殖。期望将来能够用于促进创面愈合。……