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陆地棉抗黄萎病相关基因GhRPL18的分析与功能验证

龚骞;杨召恩;杨作仁;李付广

  基于中植棉2号鉴定出与抗黄萎病相关的核糖体蛋白基因,命名为GhRPL18。A组该基因全长1397 bp,D组中其全长1387 bp;两者的编码序列(CDS)区均为537 bp,编码178个氨基酸。进化树分析结果表明GhRPL,18蛋白与Theobroma cacao(可可)中的RPL18蛋白的相似性最高,Weblogo分析结果表明该蛋白的保守性很强。通过对A组和D组中GhRPL18分析,发现两者相似性极高,且启动子区有与抗病相关的大量顺式作用元件。qRT-PCR结果表明GhRPL18在抗病品种(中植棉2号)中被黄萎病菌诱导表达,而在感病品种(冀棉11)中表达量变化不大。通过病毒诱导基因沉默(VIGS)技术,在中植棉2号中成功沉默基因GhRPL18;利用表型观察、统计病指、大丽轮枝菌定量以及恢复实验,我们发现抗病品种中的GhRPL18被沉默后,其对黄萎病的抗性丧失,这表明GhRPL18在陆地棉抗黄萎病中起到了重要作用。……