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同型半胱氨酸诱导血管内皮细胞凋亡的研究

汪炳华;张冀;王韻;陈丽达

  血浆中同型半胱氨酸(Homocysteinc,Hcy)的浓度升高是的一种独立危险因子,其致动脉粥样硬化的机制尚未阐明。本实验研究观察了在铜离子的介导下HCY对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的损伤作用,并对其可能机制进行了初步探讨。噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,硫代巴比妥酸比色法测定细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化,琼脂糖凝胶电泳观察DNA断裂,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果显示:HCY(0.1~1.0mmol/L)和铜离子(5~20μmol/L)单独作用对HUVEC均无明显的损伤作用;而当HCY(0.1~1.0mmol/L)与生理浓度的铜离子(10μmol/L)共同作用HUVEC 24h后,细胞存活率明显下降,Hoechst33258染色显示内皮细胞呈现典型的凋亡核固缩及核碎裂表现,琼脂糖凝胶电泳出现典型的梯形DNA条带,细胞凋亡率随HCY浓度的增加而显著增加,同时,细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量也明显增加。以上结果表明HCY可在铜离子的介导下损伤脐静脉血管内皮细胞并能诱导其凋亡,其机制可能与HCY在铜离子存在的条件下诱发细胞氧化应激有关,详细机制正在进一步研究之中。……