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NEP1-40基因转染对Nogo-A干预后的神经干细胞轴突及生长锥影响的研究

宋跃明;袁海峰;刘浩;刘立岷;孔清泉;周春光

  目的:通过研究NEP1-40转染前后Nogo-A干预后的神经干细胞对神经轴突生长以及生长锥影响及Nogo受体变化,探讨NEP1-40基因转染后对神经干细胞生物学功能及分化的影响。方法1、实验设基因转染组(A组)、空病毒转染组(B组)以及未转染组(C组),、将各组神经干细胞悬液以相同密度接种,分别以0μg/L 0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.8μg/mL不同浓度Nogo-A干预,然后在分化2、4、7天行免疫荧光染色检测。测量各组神经细胞轴突长度;4、各组分别在分化48小时后加入0.2μg/mL(100μl)的Nogo-A,同时设D组为正常神经干细胞对照组,加同样量的PBS(100μl),3、6、12h后行常规HE染色光学显微镜下观察,12h后扫描电镜观察,研究各组生长锥变化情况。结果、各个组别神经干细胞在6h内大部分贴壁并开始分化,24h即可观察到明显的细胞突起伸出,分化第1天几乎全部贴壁细胞均有突起伸出。在A组,B组和C,神经干细胞的贴壁分化时间无明显变化,分化……