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重组人心肌肌红蛋白基因工程菌的构建

张欣;张春明;王德芝

  目的构建稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白(rhMb)的基因工程菌株,为临床检测早期心肌损伤及预后提供诊断试剂,促进肌红蛋白诊断标准化的研究。方法采用 RT-PCR 技术从人心肌组织总 RNA 中克隆出全长的人心肌肌红蛋白基因,将其插入到 PMD18-T simple 克隆载体中,转化 DH5 α克隆菌株。经酶切和测序对目的基因分析,再插入到 pET-21a(+)表达载体中,转化 BL21(DE3)。对诱导表达的目的蛋白行 SDS-PAGE 和运用锐普心梗仪检测重组蛋白的抗原性并准确定量。结果测序表明 RT (?) CR 所得的肌红蛋白基因 hMb 序列与 GenBank(NM 005368.2)中报道的序列一致,目的蛋白表达量达菌体总蛋白的15%,重组蛋白抗原性良好。结论成功构建了稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白基因工程菌株。……   
[关键词]:重组;心肌肌红蛋白;基因工程菌
[文献类型]:会议论文
[文献出处]: 《第四届中国核学会省市区“三核”论坛论文集2007年