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抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立

裴世春

  采用Aflatoxin M1-bovine serum albumin(BSA)conjugate免疫8周齢Balb/C小鼠,4次免疫后,使小鼠产生较强免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得一株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系。其染色体平均计数为90±10对,间接ELISA检测该株系培养上清的效价为1:6400,纯化腹水效价为5000×27,与黄曲霉毒素M1(AflatoxinM1,AFM1)及其结构类似物黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),统一的交叉反应率分别为100%、7%、0%。经传代30代后,抗体效价稳定。并在此基础上建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度是0.08ng/mL,校正曲线的线性范围为0.08~5ng/mL,线性回归方程为y=-8.0064X+83.403(R2=0.9976)。该方法的加标回收率为80.0%~128.3%。……   
[关键词]:黄曲霉毒素M1;酶联免疫吸附测定;单克隆抗体
[文献类型]:会议论文
[文献出处]: 《第十届中国科协年会论文集(三)2008年