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朱砂叶螨β-actin基因cDNA片段的克隆及实时荧光定量PCR方法的建立

薛传华;何林;赵志模

  本研究旨在建立朱砂叶螨β-actin基因的real-time PCR技术,为朱砂叶螨功能基因mRNA水平的定量分析提供有效的方法和技术。参考已知蜱类和昆虫的Actin基因序列设计PCR引物,用RT-PCR方法克隆出了朱砂叶螨β-actin基因cDNA片段,包含822个碱基对(bp),编码273个氨基酸。根据此β-actin基因的序列设计引物,建立了基于SYBR GreenⅠ染料技术的real-time PCR方法。结果表明,所建立的方法具有扩增效率高、检测范围广、检测周期短等特点。研究结果为朱砂叶螨β-actin基因作为内参基因用于相关基因定量表达分析奠定了基础。……